Buen video!, gracias. Tengo una pequeña corrección, pero no menos importante: Generalmente cuando se va a producir el ADN recombinante, no se corta el gen como tal del organismo de interés que codifica para la proteína de interés, ya que esto puede tener muchos problemas, el primero será que nada te asegura encontrar secuencias palindrómicas específicas para las enzimas de restricción que hay disponibles justo en los extremos del gen, además sobre todo cuando son organismos eucariotas, partir del ADN genómico puede producir muchos errores en el proceso de corte y empalme del ARNm transcripto (y directamente si el hospedero son bacterias, no son capaces de realizar el proceso de corte y empalme, lo cual producirá un ARNm que codificará para una cadena polipeptídica no funcional). Lo que se suele hacer cuando el donador son procariotas sobre todo, es amplificar el gen utilizando cebadores que contienen parte que hibrida con el extremo del gen de interés y otra parte que posee los sitios de corte para las enzimas de restricción que se van a utilizar, con algunos nucleótidos extras para que se produzca la correcta unión de la enzima, de esta forma por PCR se obtienen amplicones ideales para insertar en el vector. Si el organismo donador es un eucariota y se desea expresar en un organismo que posee procesos de corte y empalme alternativos al del organismo donador, para evitar los errores que puedan surgir en este proceso, lo que se hace es una extracción de ARNm, luego se retrotranscribe con cebadores poli dT que hibridan con las regiones del extremo poli A presente únicamente en ARNm maduro, entonces ahí se obtienen muchos ADNc de los ARNm maduros que habían, y a esos ADNc se los amplifica por PCR de la misma forma que expliqué para procariotas, obteniendose amplicones para pegar en el vector que codifican para la proteína tal cual, sin secuencias de intrones. Saludos!
@virgenflores4779
2 жыл бұрын
Dónde puedo conseguir esa información? Gracias
@juanjorios3154
2 жыл бұрын
@@virgenflores4779 hay varios libros distintos de biotecnología, la verdad no sé cuál te recomiendo. Por mi parte esa información la saqué a partir de un curso en biotecnología que hice, y el material disponible era propio del curso, la redacción la hice a partir de unificar conceptos que aprendí, ahora no tengo disponible el matetial más que en mi cabeza, disculpa no haberte sido de ayuda.
@ivanmunozgonzalez9139
Жыл бұрын
Buen vídeo!!
@jeremycriollo7821
2 жыл бұрын
No se dice primeramente, se dice: en primer lugar xd
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